
時間:2021-03-05 瀏覽:2442次
酶免疫測定(enzyme immunoassay, EIA)或免疫酶技術(immunoenzymatic technique)是指用酶標記抗體或酶標記抗體進行的抗原抗體反應。它采用抗原與抗體的特異反應與酶連接,然后通過酶與底物產生顏色反應,用于定量測定。
酶聯免疫吸附(ELISA)可以:(1)免疫酶染色各種細胞內成份的定位。(2)研究抗酶抗體的合成。(3)顯現微量的免疫沉淀反應。(4)定量檢測體液中抗原或抗體成份。
目前常用的方法稱為酶聯免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA),其方法簡單,方便訊速,特異性強。
ELISA是由抗原(抗體)先結合在固相載體上,但仍保留其免疫活性,然后加一種抗體(抗原)與酶結合成的偶聯物(標記物),此偶聯物仍保留其原免疫活性與酶活性,當偶聯物與固相載體上的抗原(抗體)反應后,再加上酶的相應底物,即起催化水解或氧化還原反應而呈顏色。其所生成的顏色深淺與欲測的抗原(抗體)含量成正比。
實驗方法
1.標準品的加樣:設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;。
9.測定:以空白孔調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
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