SNP介紹

單核苷酸多態性（Single Nucleotide Polymorphisms，SNPs），即指由于單個核苷酸堿基的改變而導致的核酸序列的多態性。在不同個體的同一條染色體或同一位點的核苷酸序列中，絕大多數核苷酸序列一致而只有一個堿基不同的現象，這就是SNP。由于SNP在人類基因組中數量較多，發生頻率較高，因此被認為是繼微衛星之后的新一代遺傳學標記，在醫學遺傳學、藥物遺傳學、疾病遺傳學、疾病診斷學、以及人類進化等研究領域都有著很高的研究價值和應用前景。

SNP檢測技術介紹及比較：

質譜分析法（mass spectrometry）
該方法利用質譜分析對質量的靈敏度特別高的特點,很容易將僅含有一個不同堿基的兩段基因序列區別開的特點,使用質譜直接或間接檢測等位基因特異性延伸區的反應產物,推導出SNP。單堿基延伸或其修飾形式與基質輔助激光吸收/離子飛行時間(MALDI-TOF)質譜結合已被廣泛的應用,并已被美國公司(Sequenom)發展為商業性產品。我公司提供的SNP檢測技術服務，就是基于這樣的方法。

DNA芯片技術（DNA chip） 
將已知序列的寡核苷酸DNA排列在1塊集成電路板上，將熒光標記的正常DNA和突變DNA發別與2塊DNA芯片雜交，由于至少存在1個堿基的差異，正常和突變的DNA將會得到不同的雜交圖譜，經過共聚集顯微鏡檢測兩種DNA分子產生的熒光信號，確定是否存在突變。

限制性片段長度多態性分析法(RFLP)
RFLP技術利用限制性核酸內切酶識別并剪切特定DNA序列的能力,檢測基因片段上限制性核酸內切酶識別位點處是否存在核苷酸突變。應用限制性內切酶對兩個等位基因識別的差異,產生不同大小的切割片段,通過電泳遷移率的不同來判定是否存在SNP。

實時熒光PCR分析法
使用針對核酸中不同多態性序列的熒光Taqman探針，它們在PCR擴增中被水解釋放熒光信號，只有與靶序列完全匹配的探針才能被相應的切割。不同探針標記不同的熒光報道信號。利用多通道熒光PCR儀檢測結果，可以便捷判斷核酸多態性。

單鏈構象多態性分析法（SSCP）
在非變性聚丙烯酰胺凝膠上，短的單鏈DNA和RNA分子依其大堿基序列不同而形成不同構象，一個堿基的改變將影響其構象而導致其在凝膠上的移動速度改變。

DNA測序法（DNA sequencing）

雙脫氧終止法，引物用四種不同前顏色的熒光標記，使每個樣品的四個測序反應可在一個反應管和一個泳道內進行。

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臨床檢測科研轉化       病理染色分子互作
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